50.利用解離曲線分析法(melting curve analysis)進行單一核苷酸多型性(single nucleotide polymorphism, SNP)的檢測;下圖中的何種曲線是C/T異型合子(heterozygote)樣本的檢驗結果?
(A)僅A、B曲線
(B)僅B、C曲線
(C)僅A、C曲線
(D)A、B、C曲線
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統計: A(104), B(211), C(293), D(615), E(0) #3282530
統計: A(104), B(211), C(293), D(615), E(0) #3282530
詳解 (共 3 筆)
#6539423
在利用\*\*解離曲線分析(melting curve analysis)\*\*檢測 \*\*SNP(單一核苷酸多型性)\*\*時,**異型合子(heterozygote)** 通常會顯示出 **兩個熔解溫度(Tm)峰值** 或 **較寬的解離曲線**,因為異型合子樣本中含有兩種不同序列的雙股DNA(例如 C 和 T),其解離溫度不同。
### 分析圖中三條曲線:
* **A(紅色)**:解離溫度最高,表示可能是 **T/T 同型合子**。
* **C(綠色)**:解離溫度最低,表示可能是 **C/C 同型合子**。
* **B(黃色)**:解離曲線較寬,並橫跨 A 和 C 的解離溫度區間,顯示有兩種不同的熔解行為,**符合 C/T 異型合子的特徵**。
* **C(綠色)**:解離溫度最低,表示可能是 **C/C 同型合子**。
* **B(黃色)**:解離曲線較寬,並橫跨 A 和 C 的解離溫度區間,顯示有兩種不同的熔解行為,**符合 C/T 異型合子的特徵**。
### 結論:
✅ **曲線 B(黃色)** 為 **C/T 異型合子(heterozygote)** 的檢測結果。
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#7422731
問了學校老師,也和 chatGPT 討論的小小淺見
雖然是有點以答案回推,但題目應該是想問:C/T 雜合子樣本進行 melting analysis 時,會出現哪些 melting transition?
ㅤㅤ
當樣本為 C/T 雜合子時,該個體的一條染色體帶有 C,另一條帶有 T。當進行 PCR 擴增後,DNA 變性並在降溫退火時,會隨機組合成四種雙鏈形態(假設野生型為 C):ㅤㅤ
| 雙鏈型態 | 配對 | Tm |
|---|---|---|
| Homoduplex 1 | C:G | 高 |
| Homoduplex 2 | T:A | 中 |
| Heteroduplex | C:A、T:G | 低 |
從上述可知至少會有 3種 Tm 存在
而圖中:
- A = 高 Tm
- B = 中 Tm
- C = 低 Tm
剛好對應:
- C:G homoduplex
- T:A homoduplex
- mismatch heteroduplex
所以若把每條曲線視為一種 duplex 的 melting behavior,那麼 C/T 樣本裡確實同時包含: A、B、C 曲線
如果是C/C 或T/T 就1種 Tm
補充:
參考資料:https://www.researchgate.net/publication/282730931_Common_Polymorphisms_of_ATP7B_Gene_as_a_Good_Marker_in_Linkage_Analysis_in_Wilson_Disease_Patients_from_Southern_Iran
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