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學習重點 掌握尿酸酶反應：尿酸經氧化形成尿囊素，整體反應消耗氧氣與水，並產生二氧化碳及過氧化氫。 分清三種測定訊號：直接紫外光法測尿酸在 293 nm 的吸光度下降；氧電極法測氧氣消耗；過氧化酶呈色法測色素生成。 記住光源與干擾物：293 nm 測定需要適當的紫外光源，鎢絲燈不適合；膽紅素與抗壞血酸是重要干擾物。 連結尿酸代謝與痛風：尿酸是人類嘌呤分解的最終產物；單鈉尿酸鹽晶體沉積於關節，引起痛風性發炎。 核心觀念 一、尿酸酶反應：耗氧、產生過氧化氫 尿酸酶（uricase）又稱尿酸氧化酶，催化尿酸的氧化反應。在尿酸酶測定所使用的整體反應中，尿酸消耗氧氣與水，最後形成尿囊素（allantoin）、二氧化碳（CO₂）及過氧化氫（H₂O₂）。這是氧化反應，不能描述為「尿酸酶水解尿酸」。 物質反應中的角色判讀關鍵 尿酸（uric acid）受質，隨反應減少可直接追蹤其紫外光吸收下降 氧氣（O₂）反應物，隨反應消耗可用氧電極偵測 水（H₂O）整體反應的反應物不是整體反應的淨產物 尿囊素、CO₂、H₂O₂整體反應產物H₂O₂ 可供後續呈色反應利用 NADH 與一氧化碳（CO）不是此反應的產物。尤其要分清 CO₂ 與 CO：二氧化碳可以生成，一氧化碳則不是。 尿酸酶與尿素酶也不可混淆。尿酸酶作用於尿酸，並產生 H₂O₂；尿素酶（urease）作用於尿素，主要生成氨與二氧化碳。ALT 與 ALP 也不是本單元用來產生 H₂O₂ 的酵素。 二、三種尿酸酶測定方式 方法實際測量對象訊號變化 直接紫外光法尿酸在約 293 nm 的吸光度尿酸被消耗，吸光度下降 氧電極法反應中的氧氣量氧氣被消耗，氧含量下降 尿酸酶／過氧化酶呈色法由 H₂O₂ 參與反應所形成的色素色素生成，呈色吸光度上升 直接紫外光法：尿酸本身在約 293 nm 有紫外光吸收。加入尿酸酶後，尿酸逐漸被消耗，因此測定反應前後的吸光度下降量，即可推算尿酸濃度。在適當反應條件下，原有尿酸越多，吸光度下降量越大。 293 nm 所追蹤的是尿酸本身，不是尿囊素、甲醛或醌亞胺（quinoneimine）。尿囊素雖然是反應產物，仍不能將直接紫外光法解釋成「測尿囊素吸光度上升」。 氧電極法：尿酸酶反應需要 O₂，可利用氧電極測量氧氣消耗量，再換算受質尿酸的濃度。辨認這類方法時，關鍵是反應是否直接消耗氧氣，不能只因名稱中有「酶」就套用。 過氧化酶呈色法：先由尿酸酶反應生成 H₂O₂，再以過氧化酶（peroxidase）催化 H₂O₂ 與適當呈色試劑反應，形成有色產物。常見系統可形成醌亞胺類色素；在適當反應與測量條件下，呈色強度與尿酸量成正比。 尿酸酶反應不直接涉及 NAD⁺／NADH，也不生成可直接供 LDH 使用的丙酮酸。因此，不能把「搭配乳酸去氫酶（LDH），偵測 NADH 消耗」列為此處的標準尿酸酶測定方式。 三、293 nm 測定的光源 293 nm 位於紫外光區，直接測定尿酸吸光度時，需要能提供該波段光線的光源。重氫燈與石英氫燈可提供紫外光；高壓水銀燈亦可作為紫外光源。 鎢絲燈主要提供可見光與近紅外光，在 293 nm 的輸出不足，不適合此項測定。判斷重點是測定波長位於紫外光區，而非只看燈是否能發光。 四、膽紅素與抗壞血酸的干擾 尿酸酶測定應特別注意膽紅素（bilirubin）與抗壞血酸（ascorbic acid，維生素 C）。干擾程度與方向會受試劑配方、測定波長及空白校正方式影響，不宜一概視為固定偏高或固定偏低。 干擾物主要干擾觀念 膽紅素具有自身吸光特性，也可能參與反應系統中的化學反應，影響吸光測量或呈色結果。 抗壞血酸具有還原性，可消耗 H₂O₂ 或干擾色素生成；在過氧化酶呈色法中，常造成呈色不足、尿酸低估。 辨認常見干擾組合時，應優先記住膽紅素與抗壞血酸，而非將膽固醇與水楊酸、酮體與脂肪酸，或氨與碳酸氫根當成本單元的主要答案。 五、尿酸代謝與痛風 尿酸是人類嘌呤分解的最終產物。嘌呤可來自體內核酸代謝與飲食；其分解過程經次黃嘌呤、黃嘌呤，最後形成尿酸。人類缺乏具有功能的尿酸酶，無法像部分動物一樣，利用此酵素繼續將尿酸分解成尿囊素。 尿酸生成增加或排泄減少，都可能造成高尿酸血症；排泄減少是常見原因。痛風的直接病理關鍵，是單鈉尿酸鹽晶體沉積於關節及周圍組織，引發發炎。可將其關係理解為「尿酸升高，促進晶體形成與沉積，進而引起關節發炎」。 痛風相關的典型升高物質是尿酸，不是尿素、肌酸、肌酸酐、胺基酸或核酸本身。高尿酸血症也不等於一定已發生痛風；晶體沉積與發炎才是疾病的重要環節。 飲食與腎臟排泄會影響尿酸，但「蛋白質攝取過多」不能取代尿酸鹽沉積這個直接致病機轉。心衰竭可能影響腎臟排泄，亦不能因此將其當成痛風形成的主要直接原因。 常考陷阱 「293 nm 吸光度上升」：直接紫外光法測尿酸消耗，應是下降；呈色法才是追蹤色素生成。 「293 nm 測尿囊素或醌亞胺」：此波長直接法測的是尿酸，不能把反應產物或呈色色素混入。 「氧氣是產物，水也是產物」：整體尿酸酶反應消耗氧氣與水，產生尿囊素、CO₂ 及 H₂O₂。 「尿酸酶水解尿酸」：尿酸酶催化氧化；勿與尿素酶的水解反應混淆。 「以 LDH 偵測 NADH 消耗」：不能直接套用於本單元的尿酸酶測定；應辨認尿酸下降、耗氧或 H₂O₂ 呈色。 「鎢絲燈適合測 293 nm」：293 nm 是紫外光，鎢絲燈輸出不足。 「痛風是尿素或肌酸酐升高造成」：應連結尿酸升高與尿酸鹽晶體沉積；單純高尿酸血症也不等於必然發生痛風。 記憶口訣 「尿酸酶耗氧，尿囊、碳、雙氧。」尿囊指尿囊素，碳指二氧化碳，雙氧指過氧化氫。 「293 尿酸降，雙氧呈色往上長；膽紅抗壞要提防，尿酸鹽晶傷關節。」