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學習重點 總膽固醇酵素法的三個關鍵酵素：膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶與過氧化酶，依序負責水解、氧化及顯色。 總膽固醇與游離膽固醇的差別：測定總膽固醇須先水解膽固醇酯；只測游離膽固醇時，不加入膽固醇酯酶。 辨認化學呈色與飲食影響：Liebermann-Burchard 反應用於測定膽固醇；長期素食者常見的血液檢驗差異是膽固醇較低。 掌握 ATP III 採檢原則：完整血脂分析採空腹檢體；非空腹檢體仍可評估總膽固醇與 HDL-C，餐後明顯升高的主要是三酸甘油脂。 熟記三酸甘油脂與單位：空腹三酸甘油脂小於 150 mg/dL 屬正常分類，100 mg/dL 是典型正常值；1 mg＝1000 µg。 核心觀念 一、總膽固醇酵素法：先水解、再氧化、後顯色 血清膽固醇包含游離型膽固醇與酯化型膽固醇。測定總膽固醇時，必須讓兩種型態都納入測量，因此常用酵素呈色法包含下列三個步驟。 酵素反應與作用作答關鍵 膽固醇酯酶cholesterol esterase將膽固醇酯水解為游離膽固醇與脂肪酸使原本酯化的膽固醇也能進入後續反應 膽固醇氧化酶cholesterol oxidase氧化游離膽固醇，生成膽甾烯酮與過氧化氫供後續顯色使用的產物是 H2O2 過氧化酶peroxidase利用過氧化氫氧化呈色試劑，形成有色產物在方法適用範圍內，吸光度與膽固醇濃度成正比 反應順序可整理為：膽固醇酯 → 游離膽固醇 → 產生過氧化氫 → 顯色測量。膽固醇氧化酶反應不是以 NADH 或二氧化碳作為偵測產物。 膽固醇激酶不屬於此測定系統所需的酵素。一般三酸甘油脂測定所使用的解脂酶，也不是總膽固醇酵素法的必要成分；測定胆固醇酯的水解步驟，應辨認膽固醇酯酶。 二、游離膽固醇測定與酵素專一性 只測游離膽固醇時，可直接以膽固醇氧化酶作用，再利用產生的過氧化氫進行測定；試劑中不加入膽固醇酯酶，避免將酯化型膽固醇也計入。 LCAT 與 ACAT 都參與膽固醇的酯化，並非此處用於氧化游離膽固醇的測定酵素。辨認時應掌握：酯酶負責水解，氧化酶負責產生過氧化氫。 膽固醇氧化酶的專一性並非絕對，對部分結構相近的其他固醇也可能產生反應。因此，「膽固醇氧化酶完全不會與其他固醇類反應」是錯誤敘述，不能把酵素具有選擇性理解為毫無交叉反應。 三、Liebermann-Burchard 化學呈色法 Liebermann-Burchard 反應是膽固醇的化學呈色反應，利用膽固醇在醋酸酐與濃硫酸等試劑作用下產生顏色，再以比色方式測量。 它與酵素呈色法的差別在於：前者以化學試劑使膽固醇呈色，後者透過酵素反應產生過氧化氫，再進行顯色。看到 Liebermann-Burchard，應連結膽固醇，不要誤選磷脂、脂肪酸或三酸甘油脂。 四、長期素食與膽固醇 長期素食者因飲食組成不同，通常攝取較少膽固醇，部分飲食型態也含較少飽和脂肪、較多膳食纖維，因此血清總膽固醇與 LDL-C 常較低。實際數值仍受食物選擇、體質及代謝狀況影響，不能認定所有素食者的血脂都正常。 比較白蛋白、鈣、膽固醇與血紅素時，與長期素食最典型、最明顯相關的差異指標是膽固醇。不可直接推論素食者必然低白蛋白、低血鈣或貧血。 五、ATP III 的空腹與非空腹採檢原則 依 NCEP ATP III 的傳統檢驗原則，完整血脂分析採禁食 9～12 小時的檢體，禁食期間可飲白開水。空腹採檢有助於減少餐後三酸甘油脂變化，並利於評估以三酸甘油脂參與計算的 LDL-C。 若使用非空腹檢體，仍可評估總膽固醇與 HDL-C，因為這兩者相對較少受近期進食影響。因此，單獨測定總膽固醇不一定需要空腹，不能將「完整血脂分析須空腹」誤解為「飯後完全不能驗血脂」。 餐後腸道吸收脂肪並形成乳糜微粒，使血中三酸甘油脂明顯升高。在膽固醇、脂肪酶、三酸甘油脂與 LDL-C 之間，判斷未禁食造成的典型明顯上升，應選三酸甘油脂。脂肪酶是酵素檢驗項目，不是餐後血脂增加的代表指標。 六、ATP III 血脂分類與濃度單位 項目分類與數值 總膽固醇 TC理想：小於 200 mg/dL邊緣偏高：200～239 mg/dL高：至少 240 mg/dL LDL-C最佳：小於 100 mg/dL接近最佳／略高於最佳：100～129 mg/dL邊緣偏高：130～159 mg/dL高：160～189 mg/dL非常高：至少 190 mg/dL HDL-C低：小於 40 mg/dL高：至少 60 mg/dL，屬保護性風險因子 空腹三酸甘油脂 TG正常：小於 150 mg/dL邊緣偏高：150～199 mg/dL高：200～499 mg/dL非常高：至少 500 mg/dL 上述為 ATP III 的分類；不要將代謝症候群判定時使用的男女 HDL-C 門檻，混入這張一般血脂分類表。 100 mg/dL 是三酸甘油脂的典型正常濃度。「正常分類小於 150 mg/dL」主要用於區分是否升高，不表示任何接近零的數字都屬一般生理正常濃度。 單位換算為：1 mg/dL＝1000 µg/dL。因此，10 µg/dL＝0.01 mg/dL，100 µg/dL＝0.1 mg/dL。判讀時應先統一單位，再比較濃度，不能只看數字大小。 常考陷阱 「總膽固醇需要膽固醇激酶或解脂酶」：應記住酯酶、氧化酶、過氧化酶三者的反應分工。 「游離膽固醇測定也要加入酯酶」：加入酯酶會使酯化型也納入測量，失去只測游離型的目的。 「膽固醇氧化酶產生 NADH」：本法用於顯色的關鍵產物是過氧化氫。 「酵素絕不作用於其他固醇」：絕對化敘述錯誤，仍可能有交叉反應。 「飯後不能測任何血脂」：ATP III 原則下，非空腹仍可評估總膽固醇與 HDL-C；餐後影響較大的是三酸甘油脂。 「素食者一定貧血或低血鈣」：不可直接推論；此處典型的飲食差異指標是膽固醇。 「只要低於 150，任何單位都算正常」：須確認 mg/dL 與 µg/dL，並辨認一般生理濃度；100 mg/dL 才是典型正常示例。 記憶口訣 「酯酶先拆酯，氧化生過氧，過氧酶顯色；總量先拆，游離直測。」 「飯後看總膽、好膽；三酸最怕餐後漲。三酸一百正常值，毫克微克差千倍。」