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學習重點 肌酸激酶（creatine kinase，CK）催化磷酸肌酸與 ADP 之間的磷酸基轉移；生成 ATP 的方向稱為本單元的逆向反應，最適 pH 為 6.7。 CK 逆反應法以磷酸肌酸與 ADP為受質，再偶合己糖激酶及葡萄糖-6-磷酸脫氫酶，藉由 NADPH 生成速率測定 CK 活性。 檢測需要鎂離子；AMP 用於抑制腺苷酸激酶干擾，N-乙醯半胱胺酸用於活化 CK。 急性橫紋肌溶解時，血清CK 活性可升至參考值上限的 200 倍以上，是辨認嚴重骨骼肌損傷的重要酵素指標。 核心觀念 一、CK 的催化反應與方向 CK 催化可逆的磷酸基轉移反應。磷酸肌酸又稱肌酸磷酸（creatine phosphate），可提供高能磷酸基，使 ADP 形成 ATP： 磷酸肌酸＋ADP＋H+ ⇌ 肌酸＋ATP 骨骼肌等能量需求高的組織，可利用此反應快速補充 ATP。CK 的作用是轉移磷酸基，因此必須分清楚肌酸、磷酸肌酸與肌酸酐，三者不能互換。 反應方向反應物與產物判讀重點 正向反應肌酸＋ATP → 磷酸肌酸＋ADP＋H+消耗 ATP，形成磷酸肌酸 逆向反應磷酸肌酸＋ADP＋H+ → 肌酸＋ATP消耗 ADP，生成 ATP；為本單元活性測定的方向 本單元所指的生成 ATP 方向，最適 pH 為 6.7。判斷時應同時記住反應方向及受質，不要把此數值視為所有反應方向與測定條件下都相同的固定值。 二、CK 逆反應法的偶合測定 CK 活性測定利用其生成的 ATP，接續進行兩個偶合反應，將 CK 的作用轉成可以測量的吸光度變化。 CK 反應：磷酸肌酸＋ADP＋H+ → 肌酸＋ATP。 己糖激酶（hexokinase，HK）反應：ATP＋葡萄糖 → 葡萄糖-6-磷酸＋ADP。 葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase，G6PD）反應：葡萄糖-6-磷酸＋NADP+ → 6-磷酸葡萄糖酸內酯＋NADPH＋H+。 整體順序為CK 生成 ATP → HK 生成葡萄糖-6-磷酸 → G6PD 生成 NADPH。因此，兩個偶合酵素是HK 與 G6PD。 NADPH 在 340 nm 有吸收；在偶合酵素與受質足量、測定條件適當時，吸光度增加速率與 CK 活性成正比。此法測量的是NADPH 的生成，並非 CK 直接生成 NADPH，也不是觀察 NADPH 被消耗。 三、反應試劑的成分與功能 成分功能辨認關鍵 磷酸肌酸提供磷酸基為逆向反應的受質 ADP接受磷酸基而形成 ATP逆反應測定必須提供的受質 鎂離子（Mg2+）為激酶反應所需的金屬離子輔因子不可誤記為鈣離子 葡萄糖供 HK 反應形成葡萄糖-6-磷酸參與第一個偶合反應 NADP+在 G6PD 反應中還原為 NADPH連結至吸光度增加 AMP抑制腺苷酸激酶造成的干擾不是用來抑制 CK N-乙醯半胱胺酸（N-acetylcysteine，NAC）維持或恢復 CK 活性所需的還原狀態為 CK 活化劑 腺苷酸激酶（adenylate kinase，AK）可催化「2 ADP ⇌ ATP＋AMP」。若 AK 在檢體中產生 ATP，這些 ATP 也會進入 HK 與 G6PD 偶合系統，使 NADPH 增加，造成 CK 活性假性偏高。添加 AMP 的目的，就是抑制這項非 CK 來源的干擾。 CK 活性與其硫氫基的還原狀態有關。NAC 具有還原作用，可協助再活化受氧化影響的 CK。因此，AMP 與 NAC 的角色不同：前者抑制干擾酵素，後者活化待測酵素。 「試劑需添加鈣離子」是錯誤敘述；此測定所需的金屬離子是鎂離子。 四、急性橫紋肌溶解的實驗室標記 橫紋肌溶解時，骨骼肌細胞受損，細胞內的 CK 釋放至血液，使血清 CK 活性明顯升高。嚴重病例可達參考值上限的 200 倍以上。這是可能出現的顯著升高幅度，不是每位病人都必須達到的診斷門檻。 血中或尿中肌紅蛋白亦可增加，並可能伴隨高血鉀及腎功能受損。就血清酵素活性的辨認而言，應掌握橫紋肌溶解與 CK 大幅升高的連結。 酵素主要判讀意義 CK肌肉損傷的重要酵素標記；急性橫紋肌溶解時可極度升高 天門冬胺酸轉胺酶（AST）可因骨骼肌損傷而升高，但也存在於肝臟等組織，來源不具專一性 γ-麩胺醯轉移酶（GGT）主要用於肝膽相關判讀，並非橫紋肌溶解的典型酵素標記 5′-核苷酸酶主要用於肝膽相關判讀，並非嚴重骨骼肌破壞的代表指標 常考陷阱 把逆反應的受質選成 ATP 或肌酸：先確認方向；逆反應以磷酸肌酸及 ADP 為受質，ATP 與肌酸是產物。 把肌酸酶、肌酸酐酶當成 CK：肌酸酶（creatinase）與肌酸酐酶（creatininase）不負責將磷酸肌酸的磷酸基轉給 ADP。具有此作用的是肌酸激酶。 看到酸性 pH 就選酸性磷酸酶：酵素應依催化反應判斷；在 pH 6.7 催化磷酸肌酸與 ADP 形成 ATP 的仍是 CK。 把 G6PD 寫成葡萄糖-6-磷酸酶：本法需要脫氫酶將 NADP+ 還原成 NADPH；磷酸酶的去磷酸化作用無法取代此步驟。 將偶合酵素換成葡萄糖氧化酶、丙酮酸激酶、乳酸脫氫酶或蘋果酸脫氫酶：本單元逆反應法的固定組合是 HK 加 G6PD。 混淆試劑作用：AMP 抑制 AK；NAC 活化 CK；需要的是鎂離子，不是鈣離子。 因 AST 也會上升而忽略 CK：遇到急性橫紋肌溶解及參考值上限 200 倍以上的酵素活性升高，應辨認 CK。 記憶口訣 「逆向 ADP 接磷，六點七產 ATP；HK 接力，G6PD 生 NADPH。」 「AMP 壓 AK，NAC 活 CK；要鎂不選鈣，肌溶解看 CK。」